自备实验用品及仪器
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体102mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃保存。
酶液提取
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
3. 血清：直接测定。
测定操作
| 空白管 | 测定管 |
样品（μL） |
| 20 |
试剂一（μL） | 20 |
|
试剂二（μL） | 100 | 100 |
充分混匀，37℃反应30min |
试剂三（μL） | 80 | 80 |
充分混匀，于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定410nm处吸光值，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管。 |
酶活计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0191x - 0.0103，R2 = 0.9991
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/mg prot）=（△A+0.0103）÷ 0.0191×V反总÷(V样×Cpr) ÷T
= 17.45×（△A+0.0103）÷ Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/g 鲜重）=（△A+0.0103）÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T
= 17.45×（△A+0.0103）÷ W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：每104个细胞每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/104 cell）=（△A+0.0103）÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量) ÷T
= 17.45×（△A+0.0103）÷ 细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/mL）= （△A+0.0103）÷ 0.0191×V反总÷V样÷T
= 17.45×（△A+0.0103）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0095x - 0.0103，R2 = 0.9991
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/mg prot）=（△A+0.0103）÷ 0.0095×V反总÷(V样×Cpr) ÷T
= 35.09×（△A+0.0103）÷ Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/g 鲜重）=（△A+0.0103）÷ 0.0095×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T
= 35.09×（△A+0.0103）÷ W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：每104个细胞每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/104 cell）=（△A+0.0103）÷ 0.0095×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量) ÷T
=35.09×（△A+0.0103）÷ 细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升血清每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/mL）= （△A+0.0103）÷ 0.0095×V反总÷V样÷T
= 35.09×（△A+0.0103）
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，30min
BPC2601 乙酰辅酶A羧化酶（ACC）测定试剂盒（微量法） 100T/48S 1600
BPC2603 游离脂肪酸（FFA）测定试剂盒-测植物组织 100T/96S 360
BPC2604 游离脂肪酸（FFA）测定试剂盒-测血清、动物组织、微生物、细胞 100T/96S 360
BPC2605 脂肪酸合成酶（FAS）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 6000
BPC2606 酰基转移酶（AAT）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 6000
BPC2607 脂肪酶（LPS）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 600
BPC2608 脂氧合酶（LOX）测定试剂盒（微量法） 100T/48S 720
BPC2609 丙酮酸脱羧酶（PDC）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 1400
BPC2610 脂蛋白酯酶（LPL）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 750
BPC2611 甘油三酯（TG）含量测定测定试剂盒（微量法） 100T/96S 390
BPC2612 血清总胆固醇含量测定测定试剂盒（微量法） 100T/96S 350
BPC2613 游离胆固醇含量测定测定试剂盒（微量法） 100T/96S 480
BPC2614 磷脂酶D（ PLD ）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 6300
BPC2615 磷脂酶C（ PLC）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 7900
BPC2616 磷脂酶A2（PLA2）测定试剂盒（微量法） 100T/48S 7100
BPC2617 肝酯酶（HL）测定试剂盒（微量法） 100T/48S 750
BPC2618 脂蛋白酯酶（LPL）测定试剂盒（微量法） 100T/48S 750
BPC2619 血清低密度脂蛋白（LDL-C）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 480
BPC2620 血清高密度脂蛋白（HDL-C）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 480
BPC2621 肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT-1）测定试剂盒（微量法） 100T/96S 1200
