尿酸（Uric Acid, UA）含量测定试剂盒(微量法)

自备实验用品及仪器：                                                    

恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制：                                                        

缓冲液：液体20mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：

A：用于标准管和测定管，粉剂1瓶，4℃避光保存，使用前加13mL缓冲液溶解。

B：用于空白管，粉剂1瓶，4℃避光保存，使用前加7 mL缓冲液溶解。

试剂二：粉剂1管，4℃避光保存，使用前加2mL蒸馏水溶解，60℃加热溶解。

样品的制备：                                                            

1.       动植物组织：建议称取约0.1g组织，加入1mL生理盐水或蒸馏水，进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.      血清，培养液：直接检测。

测定操作表：                                                             

1、  分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至505nm。

2、  操作表

UV含量计算公式：                                                         

1. 组织：

（1）按样本重量计算

尿酸含量（μmol/g 鲜重）=C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ （W÷V样总）=0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ W

（2）按样本蛋白浓度计算

尿酸含量（μmol/mg prot）=C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ Cpr =0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷Cpr

尿酸（μmol/L）= C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）×10³

=500×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）

C标：标准品浓度0.5μmol/mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；10³ ：1μmol/ L=10³μmol/ mL

注意事项：                                                            

1. 血清样本请在24小时内测定，或者4℃密封避光保存不超过72小时。

2. 吸光值大于0.8可用蒸馏水稀释样本，并在计算公式中算入稀释倍数。

3. 最低检出限为10μmol/L。