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植物类黄酮(Flavonoid)测定试剂盒(微量法)

BPC1325 Catalogue No.
100T/48S
710.00
植物类黄酮(Flavonoid)

测定意义                                                            

类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。

测定原理                                                             

在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在510nm处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。



自备实验用品及仪器                                                    

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制                                                        

提取液:60%乙醇,自备。

试剂一:液体1mL×1管,4℃保存。

试剂二:液体1mL×1管,4℃保存。

试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。

类黄酮提取                                                            

将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.02g,加入2mL提取液,60℃振荡提取2h10000g25℃,离心10min,取上清待测。

测定操作表                                                            

1、  分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至510nm,蒸馏水调零。

2、  操作表


空白管

测定管

样本待测液(µL


108

蒸馏水(µL

108


试剂一(µL

6

6

混匀,25℃静置6min

试剂二(µL

6

6

混匀,25℃静置6min

试剂三(µL

80

80

混匀,25℃静置15 min,测定510nm处吸光值。ΔA=A测定-A空白,空白管只要做一管。

类黄酮含量计算公式                                                    

a.       用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 5.02x+0.0007R2 = 0.9996 

类黄酮含量(mg/g 干重)=ΔA -0.0007÷5.02÷(W÷V样总)= 0.398×ΔA -0.0007÷W

V样总:加入提取液体积,2.5mL V样:反应中样品体积,0.108mL W:样品质量,g

b.96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 2.51x+0.0007R2 = 0.9996

类黄酮含量(mg/g 干重)=ΔA -0.0007÷2.51÷(W÷V样总)= 0.797×ΔA -0.0007÷W

V样总:加入提取液体积,2mLV样:反应中样品体积,0.108mLW:样品质量,g

最低检出限为10µg/g

 


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